V tomto diele sa Ezio presunie do Ríma, kde bude musieť so svojou skupinou hašašínov zaútočiť na predstaviteľov skorumpovaných Templárov. V Eziovom arzenáli nebude chýbať protetická ruka, dýka, jedom naplnená striekačka, vejár, lopatka, vrtuľa, sekera alebo dve dýky naraz. Prvýkrát v sérii bude prítomný multiplayer, v ktorom si môžeš zahrať aj za Templára a v Abstergu sa vytrénuješ na vraha s vlastným spôsobom zabíjania.